一、试述菌种分离的关键技术？
菌种分离、筛选是获得优良菌种的第一步，而菌种培养是保持良种种性和应用良种产生效益的更重要一步。这里介绍菌种培养科学管理“三关键”。
（1）及时检查
各级菌种在扩繁后3天起至7天内，每天检查一次。用工作灯照亮菌种瓶内表面，观察接种块和四周，有否出现非正常菌丝和黄、红、黑、绿等斑点，宁严勿疏，一经发现异常，立即剔除，保证菌种纯度。
（2）控温防潮
根据银耳生物学特性，创造适宜菌丝生长的温度。要注意瓶内菌温一般会比室温高2～3℃。随着菌丝生长量的增加，菌种培养室的温度也逐步上升，饱和容量的培养室在适温的基础上，每5天需降温1℃。在夏、冬逆境条件下，应采取降温与升温措施，如装空调机，到高海拔山区制种，加强培育室屋顶遮荫，室内风扇、排气扇降温等。但室内不可喷水，要求室内空气相对湿度70%以下，偏湿的环境易杂菌孳生。越冬升温可采取室内安装暖气管、暖气片升温，采用空调升温更好，采用煤炭炉升温的，应设排气管道将煤烟排出室外。在梅雨季节湿度大，可在室内存放石灰粉吸潮，利用排风扇通风降湿。
（3）适度光照
银耳菌种培养需要散射光，但防止阳光直射。
二、茶树菇菌种怎么照顾？
首先清理干净料面。然后停止喷水，修养菌丝体3天。然后根据菌棒的含水量情况，决定是否需要补水。如果需要注水。需要尽快进行。注水以后。按照第一茬出菇管理方法进行管理即可。
三、怎样制作菌种？
培育双孢菇三级菌种多以麦粒为原料，在实际生产中发现污染率较高，或出现异常现象，究其原因，就是菌种生产操作的不规范所致。现提出具体规范操作技术，供菇农朋友参考。 1.原料处理：牛粪破碎处理后过筛，按1∶1.2加水拌匀，堆积发酵，每天翻堆一次，约20天左右，牛粪粉变为褐色、具有正常发酵草料的清香气味，晒干备用。无受潮的小麦，充分泡透后捞出，适当遮阴、通风，发现表皮发干时，轻喷细雾湿润，24小时后即可发芽，待麦芽长至1～2厘米时，即可使用。 如果有虫蛀麦粒，也可使用，但虫蛀后的麦粒有孔洞，淀粉易流出，所以，必须多清洗几遍；然后倒入pH值8～9的石灰水中，浸泡6小时后煮20分钟左右，至麦粒无白心时，捞出麦粒，冷水冲洗后即可。 2.基本配方：麦粒（以干品计）100公斤、牛粪粉30公斤、石膏粉1公斤、碳酸钙1.5公斤。 3.基质混合：将麦粒与牛粪粉按1∶0.2比例混合，并同时拌入其他辅料，注意使牛粪全部粘附到麦粒上，水分不足时适量喷水。剩余牛粪粉待用。 4.装瓶操作：一般小批量生产多不采用标准瓶，而利用酒瓶、葡萄糖玻璃瓶等，装瓶灭菌。为降低生产成本，可用500毫升输液瓶。先装一把牛粪粉在瓶底，约1～1.5厘米厚，再装麦粒，装瓶时稍蹾瓶，使麦粒至瓶肩以下1厘米处，然后，再装入1～2把牛粪粉，并用“L”形工具将之摊平、压实，之后塞入棉塞。 5.灭菌冷却：采用高压灭菌方法，压力维持在0.15兆帕，保持2～2.5小时。灭菌结束后，压力下降至零后，可取出料瓶，移入冷却室或接种室，室内提前3天清理干净，并喷洒百病傻溶液，料瓶降温至30℃时即可接种。 6.接种操作：室内喷洒一遍赛百09溶液后，将原种用75%酒精擦洗一次，打开接种净化机，10分钟后即可开始接种操作。每瓶（500毫升）原种可接40瓶以上。 7.发菌培养：培养室（棚）提前清理卫生，地面灌水，地毯式喷洒百病傻溶液，密闭2天后，地面撒施石灰粉，即可将接种后的菌种移入。发菌期间，尽量控制培养室温度在25℃左右，不超过28℃，安装水温空调的最低可降至22℃左右，一般农户不具备条件，可采用土法降温：发菌棚内地面上用砖码起20厘米高，铺上新塑料膜，将菌种瓶立式排入，灌入地下水，每天换水1～2次，即可使菌瓶内保持25℃以下。每3天左右喷洒一次药物以作预防，可采用百病傻与赛百09交替施用；发现有菇蚊类成虫时，随即喷施高效氯氰菊酯予以杀灭。 8.剔杂处理：接种后第三天，即开始检查剔杂，发现任何非双孢菇菌丝的菌瓶，随即移出室外，有链孢霉菌污染的，应用方便袋从上往下套住菌瓶，慢慢移出。对一般杂菌的污染，可喷施药物后将料倒出，晒干后再次利用；对链孢霉菌污染，应远离培养室倒料，并予焚烧或深埋，空瓶用70℃以上热水烫杀，洗净后再用。 9.暂时保存：约经35～45天，菌种完成发菌，暂时不用的菌种，应予低温存放，一般保持2℃～4℃条件即可。 10.质量检验：双孢菇的菌丝浓白、清晰，生长有力，呈扇形生长，绒毛状菌丝多、整齐，气生菌丝洁白；现在采用最多的“2796”属半气生型品种，其菌丝旺盛、一致；没有黄白色厚菌被；菌丝浓白粗壮，遇高温时微黄、可出现少量束状菌丝，上下均匀一致。 瓶内菌丝生长不健壮、呈散乱状态，或有“退菌”、断菌”现象，料转色、结块或干缩，出现白色、浅黄色圆形块状物或不规则暗斑，有杂菌和螨类滋生，无蘑菇香味，具漂白粉或腥臭味等，均为不合格菌种。若菌丝呈淡黄白色，且菌丝萎缩，生长无力，或生长中就有菌被形成，则为培养基较湿或较老的菌种；菌种瓶内上部菌丝收缩变干，下部菌丝生长尚好，为培养基过干，培养温度过高；如果生长不均匀，表明麦粒浸泡和预煮时间不够；若生长中菌丝渐变黄，表明培养温度过高；若菌种瓶内上方出现很厚的菌被，是生产性能差或生理性状老化的菌种，不宜使用。一直在高温条件下培养的菌种，播种后不易吃料，发菌慢。 养料：双孢菇是一种腐生菌，不能进行光合作用，配料时，在作物秸秆（麦秸草、稻草）中加入适量的农家粪（如牛、羊、马、猪、鸡和人粪尿等），还须加入适量的氮、磷、钾、钙、硫等无机养分。合理的配方是获得高产的一个重要基本条件。
温度：双孢菇菌丝体生长温度范围4℃－32℃，最适温度22℃－25℃；子实体生长温度范围5℃－25℃，最适温度14℃－18℃。
湿度：培养料的含水量以60％左右为宜，覆土的含水量16％－20％。菌丝体生长阶段空气相对温度60％－70％，子实体生长阶段85％－95％，过干或过湿对菌丝体生长都不利。
酸碱度（PH）：双孢菇宜偏碱性，偏酸对菌丝体和子实体生长都不利，而且容易产生杂菌。菌丝生长的PH值范围是5—8，最适7—8，进棚前培养料的PH值应调至7.5－8，土粒的PH值应在8—8.5。每采收完一期菇喷水时加少许石灰，以保持PH值，抑制杂菌孳生。
空气：双孢菇是一种好气性真菌，因此要有良好的通风条件。
光照：双孢菇的菌丝体和子实体均不需要光，但在一般散射光的条件下还是可以生长的，但不能强光照射。子实体在阴暗的环境下长得洁白、肥大，若光线太强，长出的子实体表面硬化，畸形菇多，商品价值差
四、菌种如何制作？
1.
准备配料
菌种制作，首先需要准备好合适的基质，其与植物不同，适合生长在木质纤维的土壤中，培养基配方为木屑77.8%、麸皮20%、石膏1%、糖1%、杀菌剂0.2%，准备完成后进行配制。
2.
基质配制
按照菌种培养基配方的比例称取配料，把木屑、麸皮、石膏等干培养料放置在干净的水泥地面上，用铁锹搅拌均匀，接着按料水比将冷水倒入容器中，糖和杀菌剂加入其中，搅拌直到全部溶解
3.
接种菌种
使用韧性强的塑料袋装料，把袋口扎紧进行灭菌，等待一段时间后开始接种，尽量将菌种覆盖培养料表面，形成生长优势，能够快速的萌发，完成后扎紧袋口，进行培养。
4.
培养环境
菌丝培养适合密闭的环境，培养袋要放在培养架上，温度保持在25-27℃左右，并定期翻袋和消毒，大概30天后，菌丝就会充满塑料袋，等到其颜色变为浓白色时，移出培养室使用。
五、制作em菌种的简单制作？
、菌种活化：取EM菌种10克、红糖0.1公斤、食盐1克、尿素1克、1公斤无菌水（开水放凉就可以）。注：（先把水加热到100°C后加入红塘，而后继续加热5分钟。冷却到40°C时加入EM菌种、食盐、尿素），密闭发酵(35°C—37°C温度)2天，打开容器口闻到有酸甜味即活化成功。可以作为液体菌种使用
六、液体菌种怎样制作？
1、配制基液
液体菌种接种前，将马铃薯煮熟提取上清液，和蛋白胨、葡萄糖、硫酸二氢钾以及玉米粉，加水后充分搅拌混合，装入容器透明的玻璃容器中，每装入100毫升时，加入5-8粒小玻璃珠，用棉塞和牛皮纸密封。
2、灭菌发酵
密封好的容器装入灭菌锅，温度升到121度时，高温灭菌40-50分钟后，关火锅盖露出缝隙。等待1小时，取出容器，放在23-25度的温室中，等待24小时活化发酵液体菌种的基液。
3、接种方法
发酵后的基液打开棉塞后，取出3-4块2厘米大小的菌种，去除菌种前端菌丝和气生菌丝，小心放入容器中，轻轻的晃动，放入25度的温室中，等待6-8天，接入菌种的基液会变成黄白色，带有苹果酸味，代表液体菌种制作完成。
4、注意事项
液体菌种制作时，温度需要控制在23-25度之间，温度过高或过低，都不利于菌种的发酵和制作，接种后在温室中，要使用摇床震荡培养，振幅控制在8厘米左右，频率控制在美分至80-100次，需要安装输氧机接入氧气。
七、怎样制作香菇菌种？
制作香菇菌种有两种方法
枝条菌种、木屑菌种
枝条菌种制作：
1、浸泡枝条
干枝条倒入池中，干枝条量约占池容积的2／3，然后用木板压盖枝条，上用重物压实，加清水至池满。浸泡约36个小时后检查枝条是否泡透。用锤子把浸泡后的枝条砸开，去掉压覆物后加入少许生石灰搅匀以调节酸碱度，然后用竹筐将枝条捞出，沥水装袋。
2、装袋灭菌
选用15厘米×35厘米的专用聚丙烯菌种袋，每个菌袋内装枝条90－100段。在菌袋外再加套一层菌袋。装满后把菌袋口纵向折叠后再折弯，用橡皮筋或塑料绳扎住，不要扎得太死，以免高温灭菌时袋内空气膨胀导致袋子被胀破。
把菌种袋放到高压锅中保持2个气压高温灭菌约2.5小时，出锅冷却至常温等待接种。
注意：
接种与发菌培养
1、接种前将接种箱内清扫干净，用气雾剂灭菌30分钟后开始接种。接种时应把木屑原种挑成玉米粒大小的块状，但不要太碎，这样可使菌种更易于萌发。接种完毕后把菌种袋移入菌种空架上并排列整齐。
2、春栽菌种在冬季制种，秋栽菌种在盛夏制种。室内温度应保持在24－27℃，要避免忽冷忽热，温差过大会影响菌丝正常生长，造成发菌缓慢。当菌种袋发菌至1／3袋时，要全面检查是否有杂菌，如有应及时拣出处理掉。发菌45天左右菌丝便可走满全袋。
八、优良的茶树菇菌种有哪些？
优良的茶树菇菌种有：如三明真菌研究所选育的茶树菇-1、茶树菇-3、茶树菇-5、江西的AS78.AS982等菌株。我区主要推广即适合市场鲜销又适合干制的茶树菇-3和茶树菇-5。其味道鲜美，脆嫩可口，清香而无异味，
茶树菇菇体含有18种氨基酸和多种矿物元素。
九、茶树菇菌种培养方法仿野生？
是的。
在决定宜种菇的稻田内建堆。料堆宽2m，高1.5m，长度不限。一般100瓶菌种的料可堆长约8-9m。技术要求：稻草要干，不宜用霉烂稻草堆制。堆料头一天，稻草要充分预湿，建堆前，蘑菇专用肥、油枯、尿素等混和均匀。千万注意：不能将尿素与石灰混和。在建堆时，先铺稻草，并将草棚改散，再泼粪水，后撒配料（辅料）。每层稻草厚度15-20㎝，共堆10-12层。料堆顶部建成屋脊形，防雨水进入。料边四周要堆直，不能下大上小或大肚细腰，必须堆制规范，以利发酵。
十、液体菌种怎么制作的？
液体菌种生产与固体培养不同，是以液体做培养基，通过多级发酵培养得到菌液，发酵菌液中含有大量的菌丝体，可直接做液体菌种。目前，液体菌种发酵生产的工艺流程有：
一是摇瓶培养工艺，即斜面母种→一级摇瓶种子→二级摇瓶种子→三级摇瓶种子；
二是深层发酵罐培养工艺，即斜面母种→种子罐→发酵罐→液体菌种。少量可用摇瓶震荡培养，大量的才用发酵罐通气培养。在农村庭院菇场，一般规模厂（场）及有条件的专业户都可采用摇瓶培养，这种方式培养设备简单，投资较少，技术不太复杂，有一般技术的人员均可采用，易于推广应用。