养殖场培养基灭菌(培养基灭菌工艺条件)

养殖吧 2022-10-08 15:36 编辑:耿利 246阅读

1. 培养基灭菌工艺条件

超过54℃。

酵母菌也叫酵母,新鲜的压缩酵母不宜冷藏过久,如果保存的时间过长,酵母会开始变为棕褐色,而且冷藏期延长的话,酵母作为膨松剂的效果会降低。

发面时,其用量为面粉量的1~2%,发面温度为28~30℃,如果温度超过54℃,酵母便会失去活性。发面时间随酵母用量、发面温度和面团含糖量等因素而异,一般为1~3小时。


2. 培养基灭菌工艺条件通常采用

金属器具先用酒精擦拭,之后干热灭菌,使用时需烧灼;塑料可用高温灭菌;有机溶剂需用过滤灭菌;双手及操作台面可用酒精擦拭,台面及操作室还需紫外灭菌;培养基需用湿热高温灭菌,至于对待不同的培养基灭菌条件都有所不同,如植物组培使用的培养基与微生物中使用的就不同,具体的应查阅相关文献.


3. 培养基的制备及灭菌器的使用

如果体积不是特别大的话(<200ml),找个大号的注射器吸上一管培养基,装上新开包装的0.22微米过滤头(我们用的是Millipore的25mm直径MillexFilter,每个小包装都是无菌的。下面那个链接里有)直接过滤就行了。否则要先灭菌滤头。每次怎么也要用几个(因为滤一会儿就堵了),你应该至少买一盒。要减少过滤中的堵塞,主要是保证你配的培养液澄清没有未溶的其他杂质。

体积再大的话你大概就要用45mm直径的过滤器(但孔径一定也要是0.22微米)和专门的holder。我没用过,我最多一次也就过滤灭菌50ml,一般都是高压灭菌

你们要求全部过滤灭菌是不是里面有对热敏感的物质?如果是这种情况的话你可以这样操作:配置除对热敏感物质外的培养液并且高压灭菌,然后配一个那个对热敏感物质的浓缩溶液并过滤灭菌这个溶液,然后加入已经冷却的培养液中。


4. 培养基及设备灭菌常规方式

MH培养基如何灭菌MH培养基可用湿热灭菌法,115度30分钟,作分离驯化蛋白酶的菌。MH培养基的使用方法:

1、 称取本品38g,加入蒸馏水或去离子水1 L,搅拌加热煮沸至完全溶解,分装三角瓶,121℃高压灭菌15min,备用.2、 试验菌液的制备:从TSA平皿上挑取3-5个形态相似的菌落顶端部分接种MHB或TSB培养基.经36±1℃培养4-6小时后,比浊至0.5麦氏单位.3、 接种:用无菌棉拭浸取比浊好的菌液,在管壁内轻轻转压除去过多菌液,然后再轻轻涂抹培养基,每一平皿涂抹三次.每次涂抹后均需将平皿转动60度,再行下一次涂抹.每一质控菌株涂抹三个平皿.4、 贴片:接种后的平皿置室温片刻,待稍干后,用无菌镊子将抗生素纸片均匀贴布于平皿琼脂表面.各纸片间中心间距不得小于24mm,纸片距平皿边不得小于15mm.一旦纸片接触琼脂表面,即不可再移动,因此时药物已开始扩散.5、 培养:纸片贴妥后,在15-30分钟内,将平皿翻过来置于36±1℃培养16—24h后,观察结果.平皿培养时不宜堆放,以二个相叠为宜.


5. 培养基常规灭菌的条件

培养基灭菌之干热灭菌条件:160~170摄氏度 ,一到两个小时 ;湿热灭菌条件 :121度15~30分钟 。


6. 培养基灭菌工艺条件是什么

包上报纸或者保鲜袋就是为了防止你灭完菌后从高压灭菌锅里拿出来时

接触到外面的空气或者污染的手啊等等造成再次污染

一般做组培时如果是用培养皿的话

是和培养基分开来灭的

培养皿用报纸包好后灭完取出来,一般要放到烘箱中干燥,去除蒸汽凝结的水

如果图省事的话,灭完后直接拿出来扔超净台里

培养基在灭菌的过程中本身就会消耗掉一部分水分

培养皿中的残留水分不会对培养基浓度造成影响

建议培养皿灭好后,有条件的话还是放在烘箱中烘干

当然不需要打开报纸,直接包着报纸干燥就行了

如果培养皿有较多水分的话,倒培养基前先在超净台里甩一下

尽量去除残留的水分

切忌在你打开报纸包装时一定要在超净台里

取出灭好的培养皿之前一定双手一定要消毒


7. 培养基的灭菌条件

pda培养基高压蒸汽灭菌就用高压蒸汽灭菌。高压蒸汽灭菌的条件是121.3℃,时间维持15~30分钟。 高压蒸汽灭菌法是一种迅速而有效的灭菌方法。 使用高压蒸汽灭菌器,利用加热产生蒸气,随着蒸汽压力不断增加,温度随之升高,通常压力在103.4kPa(相当旧制的15磅/时2或1.05kg/cm2)时,器内温度可达121.3℃,维持15~30分钟。


8. 培养基灭菌工艺条件有哪些

发酵过程中采用的灭菌方法、原理和条件采用强烈的理化因素使任何物体内外部的一切微生物永远丧失其生长繁殖能力的措施,成为灭菌。灭菌常用的方法有化学试剂灭菌、射线灭菌、干热灭菌、湿热灭菌和过滤除菌等。可根据不同的需求,采用不同的方法,如培养基灭菌一般采用湿热灭菌,空气则采用过滤除菌 。灭菌的彻底程度受灭菌时间与灭菌剂强度的制约。

微生物对灭菌剂的抵抗力取决于原始存在的群体密度、菌种或环境赋予菌种的抵抗力。灭菌是获得纯培养的必要条件,也是食品工业和医药领域中必需的技术。方法概述灭菌常用的方法有化学试剂灭菌、射线灭菌、干热灭菌、湿热灭菌和过滤除菌等。

可根据不同的需求,采用不同的方法,如培养基灭菌一般采用湿热灭菌,空气则采用过滤除菌。

热灭菌法热灭菌法利用高温使微生物细胞内的一切蛋白质变性,酶活性消失,致使细胞死亡。通常有干热、湿热和间歇加热灭菌等法。

干热灭菌火焰灼烧法或烘箱内热空气灭菌法称为干热灭菌法(dryheatsterilization)。

把金属器械或洗净的玻璃器皿放入电热烘箱内,在150~170℃下维持1~2小时后,可达到彻底灭菌(包括细菌的芽孢)的目的。

灼烧(incineration或combustion)是一种最彻底的干热灭菌法,应用范围仅限于接种环、接种针的灭菌或带病原菌的材料、动物尸体的烧毁等。

湿热灭菌以沸水、蒸气和蒸气加压灭菌。

巴氏消毒法:因最早由法国微生物学家巴斯德用于果酒消毒,故名。

这是一种专用于牛奶、啤酒、果酒或酱油等不宜进行高温灭菌的液态风味食品或调料的低温消毒方法[1] 。巴氏灭菌法就是湿热灭菌,此法有两种方式[1] ,①经典的低温维持法(lowtemperatureholdingmethod,LTH):在61.7~62.8℃下处理30分钟;②较现代的高温瞬时法(hightemperatureshorttime或flushpoint,HTST):在71.6℃或略高温度下处理15分钟。在上述诸法中,以蒸气加压灭菌效果最好,可用常压蒸气灭菌,也可在高压蒸气锅中(一般使用1千克/厘米2)灭菌,其蒸气温度可达121℃,能将耐热的芽孢在30分钟内全部杀死。

但对某些易被高压破坏的物质,如某些糖或有机含氮化合物,宜在0.6千克/厘米2压力下(110℃)灭菌15~30分钟。

煮沸消毒法:采用在100℃下煮沸数分钟的方法,一般用于饮用水的消毒[1] 。

间歇灭菌间歇灭菌连续3天,每天进行一次蒸气灭菌的方法。

此法适用于不能耐 100℃以上温度的物质和一些糖类或蛋白质类物质。

一般是在正常大气压下用蒸气灭菌 1小时。灭菌温度不超过100℃,不致造成糖类等物质的破坏,而可将间歇培养期间萌发的孢子杀死,从而达到彻底灭菌的目的。

辐射灭菌辐射灭菌在一定条件下利用射线进行灭菌的方法。较常用的有紫外线,其他还有电离辐射(射线加快中子等)。

波长在25000~80000纳米之间的激光也有强烈的杀菌能力,以波长26500纳米最有效。

辐射灭菌法仅限于某一定材料,因所需设备复杂,难于广泛使用。渗透压灭菌渗透压灭菌利用高渗透压溶液进行灭菌的方法。

在高浓度的食盐或糖溶液中细胞因脱水而发生质壁分离,不能进行正常的新陈代谢,结果导致微生物的死亡。化学试剂灭菌大多数化学药剂在低浓度下起抑菌作用,高浓度下起杀菌作用。

常用5%石炭酸、70%乙醇和乙二醇等。化学灭菌剂必须有挥发性,以便清除灭菌后材料上残余的药物。化学灭菌常用的试剂有表面消毒剂、抗代谢药物(磺胺类等)、抗生素、生物药物素抗生素是一类有微生物或其他生物生命活动过程中的合成的次生代谢产物或人工衍生物,他们在很低浓度时就能抑制或感染它种生物(包括病原菌,病毒,癌细胞等)的生命活动,因而可用作优良的化学治疗剂。


9. 培养基灭菌工艺条件包括

培养基灭菌用高压蒸汽灭菌法,压力121千帕,时间为30分钟。

培养基,是指供给微生物、植物或动物(或组织)生长繁殖的,由不同营养物质组合配制而成的营养基质。一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐(包括微量元素)、维生素和水等几大类物质。培养基既是提供细胞营养和促使细胞增殖的基础物质,也是细胞生长和繁殖的生存环境。


10. 工业培养基常用的灭菌方法

第1步:培养皿和培养基均没有灭菌,可能会有活菌影响实验结果第2 步:手帕应该放在盛有无菌水的锥形瓶中,就是所用的水与锥形瓶均要灭菌,然后才能使用第3步:报用吸管也要灭菌,并且实验操作步骤均要在无菌操作条件下进行,恒温培养,一般要十几个小时后才能观察到有菌落形成。


11. 培养基灭菌一般采用什么方法

一般培养基可采用121℃ 高压蒸汽灭菌15分钟的方法。在各种培养基制备方法中,如无特殊规定,即可用此法灭菌。

某些畏热成分,如糖类,应另行配成20% 如或更高的浓液,以过滤或间歇灭菌法消毒,以后再用无菌操作技术、定量加于培养基。

明胶培养基亦应用较低温度灭菌。血液、体液和抗生素等则应从无菌操作技术抽取和加入于经冷却约50℃ 左右的培养基中。